1. 组织源：6周龄大鼠
2. 性别：雄
3. 消毒方法：75%乙醇和含双抗无菌PBS
4. 等待时间：（组织脱离组织源后到酶解开始的等待时间）
5. 培养用液
培养基：DMEM(High-glucose)orDMEM/F12
添加因子：
EGF、Insulin
6. 消化用液
成分：0.1%Trypsin（2%）,0.1%Collagenase-2（2%）and0.1%Collagenase-4（1%）
时间：20min
温度：37℃
7. 培养方法
a. 用***麻醉大鼠，表面喷70%酒精消毒，无菌解剖，取脊椎组织；
b. 用10ml注射器吸取无菌PBS,插入脊柱中，冲出髓质和脊髓神经；
c. 将脊髓神经收集到2mlEP管中，无菌PBS清洗3次；
d. 加入1mlDMEM基础培养基和（0.1% Trypsin, 0.1% Collagenase-2 and 0.1% Collagenase-4 ）,37°消化20min,每隔5-10min振荡一次；
3. 消毒方法：75%乙醇和含双抗无菌PBS
4. 等待时间：（组织脱离组织源后到酶解开始的等待时间）
5. 培养用液
培养基：DMEM(High-glucose)orDMEM/F12
添加因子：
EGF、Insulin
6. 消化用液
成分：0.1%Trypsin（2%）,0.1%Collagenase-2（2%）and0.1%Collagenase-4（1%）
时间：20min
温度：37℃
7. 培养方法
a. 用***麻醉大鼠，表面喷70%酒精消毒，无菌解剖，取脊椎组织；
b. 用10ml注射器吸取无菌PBS,插入脊柱中，冲出髓质和脊髓神经；
c. 将脊髓神经收集到2mlEP管中，无菌PBS清洗3次；
d. 加入1mlDMEM基础培养基和（0.1% Trypsin, 0.1% Collagenase-2 and 0.1% Collagenase-4 ）,37°消化20min,每隔5-10min振荡一次；
e.充分吹打细胞消化液，200ml滤网过滤；
f.取滤液，接种至多聚赖氨酸包被的25cm2培养瓶中，37°5%CO2培养箱中培养观察