3T3细胞是一种来源于小鼠胚胎的成纤维细胞株,于1962年由瑞士细胞生物学家George Todaro和Howard Green首次从小鼠胚胎繁殖层中分离培养获得。其名称来源于“3天传代,接种体积3x105个细胞”的传代方法。中华人民共和国药典中将其作为测定部分细胞因子细胞活性的工具细胞。
3T3细胞的主要特点包括:
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能够无限增殖,具有长期传代能力。
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容易培养,生长迅速,对培养条件要求低。
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细胞形态一致,无转化性。
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可作为多种病毒的宿主细胞。
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可用于细胞融合实验。
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可诱导分化为脂肪细胞。
3T3细胞的传代培养方法:
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常规以3-4天为一个传代周期进行1:4或1:6稀释传代。
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用0.25%胰酶消化收集细胞,离心弃上清。
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调整细胞密度,接种于培养皿或培养瓶中,置于37°C、5% CO2培养箱培养。
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当细胞生长进入对数生长期时传代。
需要注意的事项:
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避免细胞污染。传代时做好无菌操作。
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传代时注意细胞状态,过度生长或老化会影响实验结果。
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定期进行细胞活力检测,确保细胞活力良好。
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细胞复苏后需要进行传代恢复,至少传代3代以上才可用于实验。
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传代时要控制细胞密度,避免细胞过稀或过密。
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传代周期和比例要根据实验需求调整。